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2024-11-12

显微课堂 | 了解显微镜的摄像系统

来源:     作者:    浏览:14

随着分析需求的增多,光学显微镜通常会搭载一套摄像系统,达到在电脑上成像、拍照、测量以及分析的目的。那么摄像系统看什么参数、对于成像质量有多大的影响、或者显示器成像倍数和目镜成像倍数是什么关系,这些问题随着显微成像的数码化,可能一直困扰着你,那么这篇会深入浅出的解析摄像系统,让你真正了解显微镜的另一双眼镜——摄像头。
首先,相机在显微成像领域的应用,可以大致分为非荧光技术和荧光技术两个方面,非荧光技术包括明场BF、暗场DF、相差PH、偏光POL、微分干涉DIC等观察法,荧光技术包括宽场荧光 (widefield fluorescence)、转盘式共聚焦 (spinning disk confocal)、全内反射荧光显微成像 (TIRFM)、超高分辨显微技术(SIM, PALM, STORM)等,以上技术成像通常用面阵检测器, 如CCD、CMOS;另外一种荧光技术如激光扫描共聚焦 (LSCM)、双光子显微成像 (two-photon)、超分辨显微技术(STED)等,通常使用点检测器,如光电倍增管PMT。
1.相机的原理:光电转换,即把显微镜部分的光信号转化为电信号,在电脑上成像。
2.相机基本结构:像素,是图像的最小单元,也叫解析度,一般像素越高,图像越清晰。
3.相机的色彩来源:
黑白相机中,只有一个维度的变化:灰度值,而要实现彩色成像,则需要一个关键技术:拜尔阵列,它模拟人眼对色彩的敏感程度,采用1红2绿1蓝的排列方式将灰度信息转换成彩色信息。采用这种技术的传感器实际每个像素仅有一种颜色信息,需要利用反马赛克算法进行插值计算,最终获得一张图像。
 
*彩色相机因为多加了一个拜尔滤镜,边缘有伪彩色问题,所以精度要低于黑白相机。
4.相机的分辨率:
1.像素大小决定相机的分辨率
2.芯片大小相同时,像素越多,像素尺寸越小,相机分辨率也越好
3.像素相同时,像素越多,芯片越大,视野越大,但相机分辨率相同
5.相机的芯片尺寸:
相机的芯片尺寸一定程度决定了成像的视野,芯片尺寸越大,视野越大

6.相机接口:
配置相机一定要搭配一个C接口,常用的有0.63倍、1倍、1.6倍等,用于转接显微镜和相机。接口倍数越小,成像的视野越大。

所以,在同一个相机下:
注意:0.63 X C-Mount 不能使用在1英寸以上芯片的相机上,否则会出现边缘黑边的情况:
噪声:干扰成像的因素,一般w66给利老牌看到带制冷的相机,可减少暗噪声(位于CCD结构中的硅层中,由于热学生成电子的统计变化而产生)。
那么,制冷温度越低就意味着这款相机就越好吗?
对一个CCD芯片来说,每降低6.7 °C,暗电流减半:
但不同相机所使用的芯片不同,所以,暗电流才是w66给利老牌真正关心的参数,而不是制冷温度。

像素融合 (Binning):一个很重要的功能,通过把多个像素融合成一个像素,从而提高读取速度,提高动态范围,但不利是会降低分辨率。
COMS和CCD的区别:
科研级COMS对比于CCD,具有更高的全幅速度,有效读出噪声较CCD低,芯片更便宜,也更容易制成相机,且适合制作大版面的相机,所以,现在越来越多的显微镜会配套CMOS相机,CCD因其工艺复杂成本高,在市场上逐渐变少。

最后,关于相机显微镜的放大倍数,在目镜上观察和在显示屏上成像,两者的倍数一直容易被混淆,这里w66给利老牌明确两者放大倍数的关系:

光学放大倍率计算

希望这篇文章能帮助大家对显微系统中的相机有更加深入的了解。

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